醫(yī)學(xué)檢測(cè)pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì).得創(chuàng)實(shí)驗(yàn)室工程專業(yè)從事pcr實(shí)驗(yàn)室工程規(guī)劃,設(shè)計(jì),施工一條路凈化工程公司,歡迎來(lái)電咨詢:027-82289886
PCR實(shí)驗(yàn)室也稱之為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù),根據(jù)放大DNA片段,也可視作是生物體外的獨(dú)特DNA拷貝。運(yùn)用基因追蹤系統(tǒng)軟件,把握人體內(nèi)部100的病毒性含量,這類實(shí)驗(yàn)的精確度可做到納米級(jí)別。
一.PCR實(shí)驗(yàn)室壓差設(shè)計(jì)
PCR實(shí)驗(yàn)室壓差設(shè)計(jì)
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)計(jì)為負(fù)壓潔凈室,通過(guò)壓差控制使整個(gè)潔凈室成為負(fù)壓潔凈室PCR試實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,試劑和標(biāo)本不受氣溶膠污染,并減少擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室和不潔凈區(qū)之間的大門(mén)保持正壓,>10Pa,實(shí)驗(yàn)與閘門(mén)之間的氣流組織方向如下:試劑準(zhǔn)備區(qū)的氣流流向閘門(mén),標(biāo)本制備區(qū)的氣流流向閘門(mén),而標(biāo)本制備區(qū)的氣流流向閘門(mén)PCR擴(kuò)建區(qū)的氣流方向由閘門(mén)流向PCR同樣的純化區(qū)也是如此;
同時(shí),根據(jù)試劑的單向流動(dòng)方向,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)不同的壓力梯度,通過(guò)試劑準(zhǔn)備區(qū)( 20Pa)、(Pa)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)(-5)Pa)、純化區(qū)(-10Pa)、擴(kuò)大反應(yīng)二區(qū)(-20)Pa)、后純化區(qū)(-25)Pa)逐漸降低壓力,形成單向負(fù)壓梯度。
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二.PCR實(shí)驗(yàn)室功能區(qū)布局設(shè)計(jì)
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)分隔開(kāi)的工作區(qū)域:
1、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
2、標(biāo)本制備區(qū)
3、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
如使用全自動(dòng)分析儀,區(qū)域可適當(dāng)合并。
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三.PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)及區(qū)域功能
PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)及區(qū)域功能
PCR實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域,進(jìn)?各?作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單??向進(jìn)?,不同的?作區(qū)域使?不同的?作服(例如不同的顏
?)。?作?員離開(kāi)各?作區(qū)域時(shí),不得將?作服帶出,四區(qū)域分別為:1.試劑配制區(qū)2.樣品處理區(qū)3.核酸擴(kuò)增區(qū)4.產(chǎn)物分析區(qū)如使?全?動(dòng)分析儀,區(qū)域可適當(dāng)合并,三四區(qū)可合并為擴(kuò)增產(chǎn)物分析。
各區(qū)的功能:完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)?作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈?作臺(tái)、離?機(jī)、加樣器等。
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采?全送全排的?流組織形式。同時(shí),要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的?例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓?要求。
1、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū) 該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)?的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和?于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送?該區(qū),不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對(duì)與?流壓?的控制,本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。
2、標(biāo)本制備區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)?的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加??擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí) DNA的合成。本區(qū)的壓?梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)?本區(qū)的?溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)??溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的?動(dòng)。
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)?的操作為DNA或DNA擴(kuò)增。ft外,已制備的DNA模板和合成的DNA(來(lái)?樣本制備區(qū))的加?和主反應(yīng)混合液(來(lái)?試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)?。在巢式PCR測(cè)定中,通 常在第?輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管,因ft巢式擴(kuò)增有較?的污染危險(xiǎn)性,第?次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)?。 本區(qū)的壓?梯度要 求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免?溶膠從本區(qū)漏出。為避免?溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的?動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)?。
4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)該區(qū)域主要進(jìn)?的操作為擴(kuò)增?段的測(cè)定。如使?全?動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè),ft區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,因ft對(duì)本區(qū)的壓?梯度的要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散?其它區(qū)域。
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