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PCR實驗室,也稱作臨床醫(yī)學基因擴增實驗室,是技術(shù)專業(yè)用以檢驗HIV、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染病癥的實驗室。小譜整理了PCR實驗室基本建設(shè)標準,并在原文中另附PCR實驗室儀器設(shè)備設(shè)備清單,供大家參考~PCR法可將病毒感染身體內(nèi)所含遺傳基因進行增加,從而檢測病毒感染者人體是否帶有特殊病毒性感染。該檢測方法具有敏感度高、非特異高、便捷性強、對樣品要求不高優(yōu)點,因此被普遍認可。PCR試驗已被普遍使用于疾病診斷,各疫防檢測單位的禽疫病確診。但是,這類試驗規(guī)定有安全系數(shù)的地理環(huán)境,合理配備的實驗室,規(guī)范化的實驗室為必要條件。近幾年來,PCR實驗室的基本建設(shè)越來越規(guī)范化,十分重視。
一.PCR實驗室壓差設(shè)計
PCR實驗室壓差設(shè)計
PCR實驗室應(yīng)設(shè)計為負壓潔凈室,通過壓差控制使整個潔凈室成為負壓潔凈室PCR試實驗過程中,試劑和標本不受氣溶膠污染,并減少擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
每個實驗室和不潔凈區(qū)之間的大門保持正壓,>10Pa,實驗與閘門之間的氣流組織方向如下:試劑準備區(qū)的氣流流向閘門,標本制備區(qū)的氣流流向閘門,而標本制備區(qū)的氣流流向閘門PCR擴建區(qū)的氣流方向由閘門流向PCR同樣的純化區(qū)也是如此;
同時,根據(jù)試劑的單向流動方向,每個實驗室設(shè)計不同的壓力梯度,通過試劑準備區(qū)( 20Pa)、(Pa)、擴增反應(yīng)一區(qū)(-5)Pa)、純化區(qū)(-10Pa)、擴大反應(yīng)二區(qū)(-20)Pa)、后純化區(qū)(-25)Pa)逐漸降低壓力,形成單向負壓梯度。
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二.PCR實驗室功能區(qū)設(shè)計
PCR實驗室功能區(qū)設(shè)計
1.普通實驗區(qū)-法醫(yī)物證常規(guī)檢驗室、法醫(yī)物證儲藏室、案例檢驗室、檢驗室、骨骼提取實驗室、數(shù)據(jù)對比分析室、應(yīng)急淋浴洗眼間、潔具間、洗衣間、測序器UPS機房;
二、特殊試驗區(qū)——/ 污染控制區(qū)——更多鞋/ /DNA提取間(30-50㎡)、嫌犯血樣DNA提取間(15-30㎡)、試劑混合間(15-30)㎡)、PCR擴增間(15-30㎡)、15-30㎡);
三、污染控制區(qū)基本格局
方案1、各功能間相互串通,即采用套房的方式進行人流/物流,應(yīng)嚴格禁止,首先從房間格局中避免交叉污染;
最好設(shè)置獨立的緩沖室(尤其是DNA提取間、PCR擴增傳遞窗口應(yīng)設(shè)置在擴增間、試劑混合間、人流/物流分流之間。也可以共用緩沖間/緩沖走廊。
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三.PCR實驗室PCR實驗室布局設(shè)計
PCR實驗室布局設(shè)計
PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū),樣品制備區(qū),擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域,并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨立的,各工作區(qū)有明顯的標志,不能直通,如果緊密連接,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),即從:試劑準備區(qū)——樣品制備區(qū)——PCR擴增室——產(chǎn)物分析室,不得逆向流動。實驗室的氣流也應(yīng)從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應(yīng)該安裝紫外燈,紫外燈波長為254mm,每20㎡一支40W的紫外燈。
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