方倉pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則.得創(chuàng)實(shí)驗(yàn)室工程專業(yè)從事PCR實(shí)驗(yàn)室工程規(guī)劃,設(shè)計(jì),施工一條路凈化工程公司,歡迎來電咨詢:027-82289886
PCR實(shí)驗(yàn)室,也稱作臨床醫(yī)學(xué)基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,是技術(shù)專業(yè)用以檢驗(yàn)HIV、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染病癥的實(shí)驗(yàn)室。小譜整理了PCR實(shí)驗(yàn)室基本建設(shè)標(biāo)準(zhǔn),并在原文中另附PCR實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備設(shè)備清單,供大家參考~PCR法可將病毒感染身體內(nèi)所含遺傳基因進(jìn)行增加,從而檢測(cè)病毒感染者人體是否帶有特殊病毒性感染。該檢測(cè)方法具有敏感度高、非特異高、便捷性強(qiáng)、對(duì)樣品要求不高優(yōu)點(diǎn),因此被普遍認(rèn)可。PCR試驗(yàn)已被普遍使用于疾病診斷,各疫防檢測(cè)單位的禽疫病確診。但是,這類試驗(yàn)規(guī)定有安全系數(shù)的地理環(huán)境,合理配備的實(shí)驗(yàn)室,規(guī)范化的實(shí)驗(yàn)室為必要條件。近幾年來,PCR實(shí)驗(yàn)室的基本建設(shè)越來越規(guī)范化,十分重視。
一.PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制
PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制
PCR實(shí)驗(yàn)室沒有嚴(yán)格的凈化要求,但為了避免各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間交叉污染的可能性,應(yīng)采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí),應(yīng)嚴(yán)格控制輸送和排氣的比例,以確保每個(gè)試驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
1.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)
該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對(duì)與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。
2. 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、存儲(chǔ)和添加到擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA合成。 區(qū)域的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的正壓,以避免從相鄰區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域的氣溶膠污染。此外,由于在樣品添加過程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠污染,因此應(yīng)避免在該區(qū)域不必要的行走。
3.擴(kuò)大反應(yīng)混合物的制備和擴(kuò)大區(qū)域
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA擴(kuò)大。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區(qū))的添加和主要反應(yīng)混合物(來自試劑儲(chǔ)存和制備區(qū))也可以在該區(qū)域進(jìn)行。 區(qū)域的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,以避免氣溶膠從區(qū)域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染,應(yīng)盡量減少該區(qū)域不必要的行走。在超凈平臺(tái)上應(yīng)進(jìn)行添加樣品等個(gè)人操作。
4、擴(kuò)大產(chǎn)品分析區(qū)域
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。 本區(qū)是zui擴(kuò)增產(chǎn)物的主要污染源,因此對(duì)該區(qū)域壓力梯度的要求是:相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從該區(qū)域擴(kuò)散到其他區(qū)域。
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二.PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)
設(shè)計(jì)要求
1 空氣潔凈度十萬級(jí)及高于十萬級(jí)的空氣凈化處理,應(yīng)采用初效、 中效、 高效過濾器三級(jí)過濾。 對(duì)于十萬級(jí)空氣凈化處理,也可采用亞高效空氣過濾器代替高效過濾器。 低于十萬級(jí)的空氣凈化處理,應(yīng)采用初效、 中效過濾器二級(jí)過濾。
2 空氣過濾器的選用、 布置方式:
a、 初效空氣過濾器不應(yīng)選用浸油式過濾器;
b、 中效空氣過濾器且集中設(shè)置在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)的正壓段;
c、 高效或亞高效空氣過濾器宜設(shè)置在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)的末端。
3 下列情況的空氣凈化系統(tǒng)宜分開設(shè)置:
a、 單向流PCR實(shí)驗(yàn)室與非單向流PCR實(shí)驗(yàn)室;
b、 高效空氣凈化系統(tǒng)與中效空氣凈化系統(tǒng);
c、 運(yùn)行班次和使用時(shí)間不同的PCR實(shí)驗(yàn)室;
4 下列情況的空氣凈化系統(tǒng),如經(jīng)處理仍不能避免交叉污染時(shí), 則不應(yīng)利用回風(fēng)。
a、 固體物料的粉碎、 稱量、 配料、 混合、 制粒、 壓片、 包衣、灌裝等工序;
b、 固體口服制劑的顆粒、 成品干燥設(shè)備所使用的凈化空氣;
c、 用有機(jī)溶煤精制的原料藥精制、 干燥工序;
d、 凡工藝過程中產(chǎn)生大量有害物質(zhì), 揮發(fā)性氣體的生產(chǎn)工序;
5 對(duì)面積較大空氣潔凈度較高,位置集中及噪音、 振動(dòng)控制要求嚴(yán)格的PCR實(shí)驗(yàn)室宜采用集中式實(shí)驗(yàn)室凈化空調(diào)系統(tǒng)。
a、 需要消毒滅菌的PCR實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)設(shè)排風(fēng)設(shè)施。
b、 PCR實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)有防倒灌措施。
c、 含有易燃、易爆物質(zhì)局部排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)有防火、 防爆措施。
d、 PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)生產(chǎn)粉塵和有害氣體的工藝設(shè)備, 應(yīng)設(shè)單獨(dú)的局部除塵和排風(fēng)裝置
6 采用分散式實(shí)驗(yàn)室凈化空調(diào)系統(tǒng)。
a、 換鞋室、更衣室、洗消室、以及廁所、淋浴室應(yīng)設(shè)通風(fēng)裝置,室內(nèi)靜壓值應(yīng)低于有空氣潔凈度要求的生產(chǎn)區(qū)。
b、 送風(fēng)、回風(fēng)和排風(fēng)的啟閉應(yīng)聯(lián)鎖。系統(tǒng)的開啟程序?yàn)橄乳_送風(fēng)機(jī),再開回風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)。系統(tǒng)關(guān)閉時(shí)操作程序反之。
c、 非連續(xù)運(yùn)行的PCR實(shí)驗(yàn)室,可根據(jù)生產(chǎn)工藝要求設(shè)置值班風(fēng)機(jī),并保證室內(nèi)空氣潔凈度和壓力。
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三.pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求
1.標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品分析區(qū)析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域(即擴(kuò)展和產(chǎn)品分析區(qū)),空氣流動(dòng)方向應(yīng)從室外流向室內(nèi)。通過在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)柜、排氣扇或其他排氣系統(tǒng),可滿足室外氣流向室內(nèi)流動(dòng)的要求。
2.PCR根據(jù)所使用的方法, 實(shí)驗(yàn)室可分為三到四個(gè)區(qū)域:試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增和產(chǎn)品分析。只使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)室,有上述前三個(gè)區(qū)域就可以了。每個(gè)區(qū)域都要完全獨(dú)立分隔,不能有任何直通空氣。
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